Fraksinasi Secara Ekstraksi Cair-Cair

LAPORAN PRAKTIKUM

FITOKIMIA

PERCOBAAN KE 6

FRAKSINASI SECARA EKSTRAKSI CAIR-CAIR

Nama                                       : Lusiana Danis Pramesti

NIM                                          : 1606067071

Kelompok                                : A3

Hari, Tanggal Praktikum        : Sabtu, 14 Juli 2018

Dosen Pembimbing                 : Erma Yunita, M.Sc., Apt

LABORATURIUM FITOKIMIA

AKADEMI FARMASI INDONESIA YOGYAKARTA

2018

HALAMAN PENGESAHAN DAN PERNYATAAN

Laporan Praktikum FITOKIMIA Percobaan Ke 6 dengan Judul FRAKSINASI SECARA EKSTRAKSI CAIR-CAIR adalah benar sesuai dengan hasil praktikum yang telah dilaksanakan. Laporan ini saya susun sendiri berdasarkan data hasil praktikum yang telah dilakukan.

Dosen Pembimbing, Erma Yunita, M.Sc., Apt

Yogyakarta, 28 Juli 2018 Mahasiswa, Lusiana Danis Pramesti

Data Laporan (Diisi dan diparaf oleh Dosen/Laboran/Asisten)

Hari, Tanggal Praktikum	Hari, Tanggal Pengumpulan Laporan
Sabtu, 14 Juli 2018	Sabtu, 28 Juli 2018

Nilai Laporan (Diisi oleh Dosen)

No.	Aspek Penilaian	Nilai
1.	Ketepatan waktu pengumpulan (10)
2.	Kesesuaian laporan dengan format (5)
3.	Kelengkapan dasar teori (15)
4.	Skematika kerja (10)
5.	Penyajian hasil (15)
6.	Pembahasan (20)
7.	Kesimpulan (10)
8.	Penulisan daftar pustaka (5)
9.	Upload data via blog/wordpress/scribd/ academia.edu (10)
TOTAL

Laporan praktikum

Fitokimia

Percobaan ke 6

Fraksinasi Secara Ekstraksi Cair-Cair

    I.        Judul Praktikum

Fraksinasi Secara Ekstraksi Cair-Cair

 II.        Tujuan Praktikum

Mahasiswa mampu melakukan fraksinasi ekstrak tumbuhan dengan Ekstraksi Cair-cair.

III.        Dasar Teori

1.    Tanaman temu kunci

Nama tanaman : Temu Kunci (Boesenbergia pandurata Roxb.)

Sinonim : Kaempferia pandurata Roxb., Gastrochilus pandurata Roxb.,

Nama simplisia : Rimpang temu kunci (Boesenbergiae rhizoma)

(Syamsuhidayat dan Hutapea, 1991)

a.    Klasifikasi tanaman

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Subdivisi : Angiospermae

Kelas : Monocotyledoneae

Subkelas : Zingiberidae

Bangsa : Zingiberales

Suku : Zingiberaceae

Marga : Boesenbergia

Spesies : Boesenbergia pandurata Roxb.

(Backer dan Van Den Brink, 1965)

b.    Deskripsi tanaman

Temu kunci (Boesenbergia pandurata Roxb.) banyak tumbuh di daerah tropis dataran rendah. Waktu berbunganya pada bulan Januari-Februari dan April-Juni. Daerah distribusi dan habitat tanaman ini adalah tumbuh liar pada dataran rendah dan di hutan jati. Tanaman ini tumbuh baik pada iklim panas dan lembab, pada tanah yang relatif subur dengan pertukaran udara dan tata air yang baik. Pada tanah yang kurang baik tata airnya (sering tergenang air) pertumbuhan akan terganggu dan rimpang cepat busuk. Perbanyakan temu kunci dapat dilakukan dengan pemotongan rimpang menjadi beberapa bagian (tiap bagian terdapat paling sedikit 2 mata tunas) dan penanaman dilakukan pada jarak tanam 3000 cm.

Temu kunci berperawakan herba rendah, merayap di dalam tanah. Dalam satu tahun pertumbuhannya 0,3-0,9 cm. Batangnya merupakan batang asli di dalam tanah sebagai rimpang, berwarna kuning coklat, aromatik, menebal, berukuran 5-30 x 0,5-2 cm. Batang di atas tanah berupa batang semu (pelepah daun). Daun tanaman ini pada umumnya 2-7 helai, daun bawah berupa pelepah daun berwarna merah tanpa helaian daun. Tangkai daun tanaman ini beralur, tidak berambut, panjangnya 7-16 cm, lidah-lidah berbentuk segitiga melebar, menyerupai selaput, panjang 1-1,5 cm, pelepah daun sering sama panjang dengan tangkai daun; helai daunnya tegak, bentuk lanset lebar atau agak jorong, ujung daun runcing, permukaan halus tetapi bagian bawah agak berambut terutama sepanjang pertulangan, warna helai daun hijau muda, lebarnya 5-11 cm. Bunga tanaman ini berupa susunan bulir tidak berbatas, di ketiak daun, dilindungi oleh 2 spatha, panjang tangkai 41 cm, umumnya tangkai tersembunyi dalam 2 helai daun terujung. Kelopak bunganya 3 buah lepas, runcing. Mahkota bunganya 3 buah, warnanya merah muda atau kuning-putih, berbentuk tabung 50-52 mm, bagian atas tajuk berbelah-belah, berbentuk lanset dengan lebar 4 mm dan panjang 18 mm. Benang sarinya 1 fertil besar, kepala sarinya bentuk garis membuka secara memanjang. Lainnya berupa bibir-bibiran (staminodia) bulat telur terbalik tumpul, merah muda atau kuning lemon, gundul, 6 pertulangan, dan ukurannya 25×7 cm. Putik bunganya berupa bakal buah 3 ruang, banyak biji dalam setiap ruang (Geonadi, dkk., 2008). Akar tanaman ini adalah akar serabut berwarna putih kekuningan (Syamsuhidayat dan Hutapea, 1991).

c.    Kandungan kimia

Rimpang temu kunci mengandung banyak senyawa turunan flavonoid, minyak atsiri, dan beberapa senyawa lain. Berdasarkan strukturnya, kandungan kimia rimpang temu kunci dibagi menjadi beberapa kelompok, yaitu kalkon (uvangoletin, kardamonin, helikrisetin, flavokawain), kalkon terprenilasi (boesenbergin A, boesenbergin B, (+)-panduratin A, (-)- panduratin A, panduratin C, (-)-isopanduratin A2, (±)-isopanduratin A1, (+)- 4-hidroksipanduratin A, (-)-4-hidroksipanduratin, (±)-6-metoksipanduratin A, (-)-nikolaiodeisin B, (+)-krakaizin A, (-)-krakaizin A, (+)-krakaizin B, (-)- krakaizin B), flavanon (pinostrobin, pinosembrin, alpinetin, sakuranetin), flavanon terprenilasi ((2R)-6-geranilpinostrobin, (2S)-6-geranilpinostrobin, (-)-6-geranilpinosembrin), flavon (contohnya tektokrisin), minyak atsiri monoterpenoid (geraniol, kamfor, borneol, mirsena, terpineol, geranial, neral, kamfena, metil sinamat, γ-terpinena), minyak atsiri non monoterpenoid (nerolidol, sitral, limonena, 11-dodeken-1-ol), dan senyawa-senyawa lain seperti 5,6-dehidrokawain, asam benzoat terprenilasi (geranil-2,4-dihidroksi-6-fenetilbenzoat), dan fenilpropanoid terprenilasi (panduratin H dan panduratin I). (Chahyadi dkk., 2014).

d.    Kegunaan temu kunci

Boesenbergia pandurata telah lama dimanfaatkan dalam pengobatan tradisional untuk mengobati gangguan perut, diare, kolik, batuk kering, karies gigi, iritasi rongga mulut, rematisme, dan infeksi jamur. Selain itu telah diuji juga sebagai antiseptik pada luka terbuka, antimutagenik, antitumor, antiinflamasi, antioksidan, antibakterial, antiviral, antiparasit, antiulkus, antiobesitas, dan pencegah hiperpigmentasi (Chahyadi dkk., 2014). Minyak atsiri rimpang temu kunci berefek pada pengurangan pertumbuhan Entamoeba coli, Staphylococcus aureus, dan Candida albicans. Selain itu, dapat berefek pula dalam pelarutan batu ginjal kalsium secara in-vitro. Perasan dan infus rimpang temu kunci juga memiliki daya analgetik dan antipiretik (Sudarsono dkk., 2002).

2.    Ekstraksi

Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan/senyawa kimia yang dapat larut sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan menggunakan pelarut cair (Anonim, 2000). Pemisahan senyawa aktif dalam ekstrak dapat dilakukan dengan partisi. Prinsip partisi yaitu menggunakan pelarut yang kepolarannya sesuai dengan kepolaran senyawa, seperti melarutkan senyawa polar dalam pelarut polar ataupun senyawa non polar dalam pelarut non polar. Proses partisi bergantung pada perbedaan kemampuan larut solut dalam dua macam pelarut (solven) yang tidak saling campur dan berbeda polaritasnya berdasarkan prinsip like-dissolves-like (Snyder dan Kirkland, 1997).

Senyawa aktif yang terdapat dalam simplisia biasanya digolongkan ke dalam golongan minyak atsiri, alkaloid, flavonoid dan lain-lain. Dengan diketahuinya senyawa aktif yang dikandung simplisia akan mempermudah pemilihan pelarut dan cara ekstraksi yang tepat. Simplisia yang lunak seperti rimpang dan daun mudah diekstraksi oleh pelarut, karena itu penyerbukan simplisia tidak perlu sampai halus sebelum diekstraksi. Penyerbukan sampai halus diperlukan pada simplisia yang keras seperti biji, kulit kayu dan kulit akar karena zat aktifnya susah diserap oleh pelarut. Selain memperhatikan sifat fisik dan senyawa aktif dari simplisia, harus juga diperhatikan senyawa-senyawa lain yang terdapat dalam simplisia seperti protein, karbohidrat, lemak, dan gula, karena senyawa-senyawa ini akan mempengaruhi tingkat kejenuhan pelarut sehingga akan berpengaruh pula pada proses pelarutan senyawa aktif (Anonim, 2000).

3.    Fraksinasi

Proses pemisahan senyawa yang terkandung dalam ekstrak melibatkan pembagian ekstrak menjadi fraksi-fraksi tertentu. Tipe fraksinasi tergantung dari sampel dan tujuan pemisahannya. Biasanya eluen dijalankan dalam kolom dan eluat dipisahkan menjadi fraksi-fraksi yang dapat diatur, diikuti dengan analisis fraksi untuk mendeterminasi kandungan senyawa masing-masing fraksi, kemudian diambil fraksi dengan kandungan yang diinginkan. Mengumpulkan eluat ke dalam fraksi-fraksi yang lebih kecil dimaksudkan untuk mengumpulkan senyawa-senyawa sedemikian rupa sehingga didapatkan sekumpulan senyawa yang lebih murni. Namun demikian, diperlukan perlakuan lebih lanjut pada setiap fraksi untuk memastikan kemurnian senyawa yang terkandung.

4.    Kromatografi Lapis Tipis

Kromatografi adalah suatu nama yang diberikan untuk teknik pemisahan tertentu. Pada dasarnya semua cara kromatografi menggunakan dua fase yaitu fasa tetap (stationary) dan fasa gerak (mobile), pemisahan tergantung pada gerakan relatif dari dua fasa tersebut.

Cara-cara kromatografi dapat digolongkan sesuai dengan sifat-sifat dari fasa tetap, yang dapat berupa zat padat atau zat cair. Jika fasa tetap berupa zat padat maka cara tersebut dikenal sebagai kromatografi serapan, jika zat cair dikenal sebagai kromatografi partisi. Karena fasa bergerak dapat berupa zat cair atau gas maka semua ada empat macam sistem kromatografi yaitu kromatografi serapan yang terdiri dari kromatografi lapis tipis dan kromatografi penukar ion, kromatografi padat, kromatografi partisi dan kromatografi gas-cair serta kromatografi kolom kapiler (Hostettmann, K., dkk., 1995).

IV.        Alat dan Bahan

ALAT

1.    Beaker glass

2.    Erlenmeyer

3.    Corong pisah

4.    Gelas ukur

5.    Rotary evaporator

BAHAN

1.    Ekstrak hasil maserasi temu kunci

2.    n-Heksan

3.    Etil Asetat

4.    Etanol 96%

5.    Aquadest

6.    Standar pinostrobin

   V.        Cara Kerja

1.    EKSTRAKSI CAIR-CAIR

Ekstrak etanol hasil maserasi diencerkan dengan etanol-air (1:1) sebanyak 150 ml, diaduk terus sampai encer dan homogen, kemudian dimasukan kedalam corong pisah, difraksinasi berturut-turut dengan pelarut n-heksan dan etil asetat. Mula-mula difraksinasi dengan n-heksan sebanyak 150 ml diperoleh fraksi n-heksan dan etanol. Fraksi n-heksan dipisahkan, kemudian fraksi etanol difraksinasi lagi dengan n-heksan sebanyak 150 ml, diperoleh fraksi n-heksan dan fraksi etanol. Fraksi n-heksan dipisah. Fraksi etanol-air difraksinasi lagi dengan etil asetat sebanyak 150 ml. Diperoleh fraksi etil asetat dan fraksi air. Ekstraksi dilakukan sebanyak 3 kali dengan menggunakan 50 ml pelarut untuk setiap penyarian. Sari pertama, kedua dan ketiga dikumpulkan dalam erlenmeyer secara terpisah. Ekstrak hasil fraksinasi dipekatkan dengan rotary evaporator.

2.    IDENTIFIKASI

Kromatografi lapis tipis:

a.    Fase diam : Silika gel GF 254

b.    Fase gerak : n-heksan : etil asetat (4:1)

c.    Cuplikan : Hasil fraksi dan standar pinostrobin

d.    Deteksi : UV 254

VI.        Hasil

Nama simplisia                 : Boesenbergia pandurata

Metode ekstraksi               : Maserasi

Rendemen ekstrak   : -

Urutan farksinasi               :

1.    Ekstrak temu kunci hasil maserasi

2.    Difraksinasi sebanyak 4 kali dengan air 20 ml dalam corong pisah. Jika perlu ditambahkan NaCl untuk mempercepat pemisahan.

3.    Hasil fraksinasi ke-2 dan ke-4 diuji kromatografi lapis tipis dengan pembanding pinostrombin dari ekstrak temu kunci.

Jarak yang ditempuh pelarut                                     : 8 cm

Jarak yang ditempuh sampel dan pembanding            : 4 cm

Harga Rf                                                                : 0,5

VII.        Pembahasan

Ekstraksi cair-cair merupakan cara pemisahan satu atau kebih senyawa dengan menggunakan dua pelarut yang tidak bercampur dimana senyawa tersebut terdispersi diantara dua fase sesuai dengan derajat kelarutannya sehingga masing-masing jenuh dengan perbandingan konsentrasi tertentu dan terjadi pemisahan. Metode ekstraksi ini seringkali disebut proses partisi dari “crude extract” atau ekstrak kasar sehingga diperoleh sekumpulan senyawa kimia dengan tingkat kepolaran yang berbeda-beda.

Pada praktikum ini dilakukan fraksinasi secara cair-cair menggunakan ekstrak maserasi temu kunci dan air yang dipisahkan di corong isah. Jika perlu ditambahkan NaCl untuk menarik air kebawah sehingga pemisahan terlihat jelas terutama saat fraksinasi dilakukan berulang. Fraksinasi yang dilakukan sebanyak 4 kali dengan aquadest.

Berdasarkan hasil praktikum dapat terlihat pendaran cahaya hijau dari samoel fraksinasi ke-2, fraksinasi ke-4 dan pembanding pinostrombin yang terkandung dalam ekstrak temu kunci menggunaan silika gel GF 254 dibawah sinar UV 366 nm. Cahaya berpendar terang pada ekstrak temu kunci, disusul hasil fraksinasi ke-2 dan hasil fraksinasi ke-4, hal ini menunjukkan semakin banyak fraksinasi yang dilakukan semakin redup pla cahaya pendaran sampel.

Hasil penjenuhan dengan fase gerak n-heksan : eril asetat (4:1) didalam chumber didapatkan hasil jarak ketiga totolan sampel dan pembanding sama sehingga harga Rf-nya sama yaitu 0,5.

VIII.        Kesimpulan

Berdasarkan hasil praktikum dapat disimpulkan bahwa hasil fraksinasi menganding pinostrobin. Tebal tipisnya cahaya yang berpendar dipengaruhi oleh banyaknya pinostrobin yang terkandung dan banyaknya fraksinasi. Harga Rf sampel dan standar sama yaitu 0,5.

IX.        Daftar Pustaka

Hostettmann, K., dkk., 1995, Cara Kromatografi Preparatif, Penerbit ITB, Bandung.

Departemen Kesehatan RI, 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan

Obat. 3 – 5. Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia.

Syamsuhidayat, S.S dan Hutapea, J.R, 1991, Inventaris Tanaman Obat Indonesia,

edisi kedua, Departemen Kesehatan RI, Jakarta

Backer, C.A and Van den Brink, R.C.B., 1965,  Flora of Java Volume I,  

N.V.P.Noordhoff, Groningen.

Cahyadi, A., Hartati, R., Wirasutisna, K,R.,  and Elfahmi. 2014. Boesenbergia 

pandurata Roxb., An Indonesian  Medicinal Plant: Phytochemistry,  Biological Activity, Plant  Biotechnology. Procedia Chemistry 13: 13-37

Sudarsono, Gunawan, D., Wahyuono, S., Donatus, I.A., dan Purnomo, 2002,

Tumbuhan Obat II, Hasil Penelitian, Sifat-sifat dan Penggunaan, 96-100, Pusat Studi Obat Tradisional, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta

Snyder LR, Kirkland JJ, Glajch JL.Practical HPLC Method Development Second

Edition, John Wiley & Sons, Inc, New York, 1997:616-712