ISOLASI DAN IDENTIFIKASI MINYAK ATSIRI DARI DAUN SEREH (Cymbopogon winterianus)

LAPORAN PRAKTIKUM

FITOKIMIA

PERCOBAAN KE 5

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI MINYAK ATSIRI DARI DAUN SEREH (Cymbopogon winterianus)

Nama                                       : Lusiana Danis Pramesti

NIM                                          : 1606067071

Kelompok                                : A3

Hari, Tanggal Praktikum        : Sabtu, 5 Mei 2018

Dosen Pembimbing                 : Erma Yunita, M.Sc., Apt

LABORATURIUM FITOKIMIA

AKADEMI FARMASI INDONESIA YOGYAKARTA

2018

HALAMAN PENGESAHAN DAN PERNYATAAN

Laporan Praktikum FITOKIMIA Percobaan Ke 5 dengan Judul ISOLASI DAN IDENTIFIKASI MINYAK ATSIRI DARI DAUN SEREH (Cymbopogon winterianus) adalah benar sesuai dengan hasil praktikum yang telah dilaksanakan. Laporan ini saya susun sendiri berdasarkan data hasil praktikum yang telah dilakukan.

Dosen Pembimbing, (Erma Yunita, M.Sc., Apt)

Yogyakarta, 26 Mei 2018 Mahasiswa, (Lusiana Danis Pramesti)

Data Laporan (Diisi dan diparaf oleh Dosen/Laboran/Asisten)

Hari, Tanggal Praktikum	Hari, Tanggal Pengumpulan Laporan
Sabtui, 5 Mei 2018	Sabtu, 26 Mei 2018

Nilai Laporan (Diisi oleh Dosen)

No.	Aspek Penilaian	Nilai
1.	Ketepatan waktu pengumpulan (10)
2.	Kesesuaian laporan dengan format (5)
3.	Kelengkapan dasar teori (15)
4.	Skematika kerja (10)
5.	Penyajian hasil (15)
6.	Pembahasan (20)
7.	Kesimpulan (10)
8.	Penulisan daftar pustaka (5)
9.	Upload data via blog/wordpress/scribd/ academia.edu (10)
TOTAL

LAPORAN PRAKTIKUM

FITOKIMIA

Percobaan 5

Isolasi dan Identifikasi Minyak Atsiri dari Daun Sereh (Cymbopogon winterianus)

         I.            Judul Praktikum

Isolasi dan Identifikasi Minyak Atsiri dari Daun Sereh (Cymbopogon winterianus).

      II.            Tujuan Praktikum

Mahasiswa dapat memahami prinsip isolasi minyak atsiri dan dapat mengerjakan isolasi beserta identifikasinya dengan kromatografi lapis tipis (KLT).

   III.            Dasar Teori

1.      Monografi Sereh

Sistematika tanaman sereh sebagai berikut (Lutony, 2002):

Kingdom : Plantae

Subkingdom : Tracheobionta

Super Divisio : Spermatophyta

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Liliopsida

Subkelas : Commelinidae

Ordo : Poales

Famili : Poaceae

Genus : Cymbopogon

Spesies : Cymbopogon nardus L

Di Indonesia, terdapat dua jenis tanaman sereh, yaitu sereh dapur (Cymbopogon citratus) dan sereh wangi (Cymbopogon nardus L). Di Srilangka, tanaman ini tumbuh alami, tetapi dapat di tanam dalam berbagai kondisi tanah di daerah tropis yang lembab, cukup matahari, dan memiliki curah hujan relatif tinggi. Di indonesia, tanaman sereh banyak di temui di daerah Jawa dan dikenal dengan nama ‘sere’ (Armando, 2009).

Tanaman sereh Jawa tumbuh pada berbagai tanah yang memiliki kesuburan cukup. Tanah jenis geluh pasiran pada ketinggian 180-450 m di atas permukaan laut, iklim lembab dengan curah hujan teratur menghasilkan minyak yang berkualitas tinggi. Hasil minyak sereh yang paling tinggi diperoleh dari tanaman yang ditanam pada tanah geluh pasiran dengan pH 6,00 hingga 6,50, Sedangkan tanah dengan pH lebih rendah tidak cocok untuk tanaman sereh (Sastrohamidjojo, 2004).

Kandungan kimia yang terdapat di dalam tanaman sereh antara lain, sitronelal, geraniol, sitronelol dan sisa hasil destilasi mengandung sekitar 2 % nitrogen yang dapat digunakan sebagai pupuk (Sastrohamidjojo, 2004). Termasuk suku rumput rumputan, di budayakan untuk di ambil daunnya sebagai bumbu masak,atau disuling di ambil minyaknya (Harris, 1990).

2.      Destilasi

Prinsip destilasi adalah untuk isolasi atau pemisahan dua atau lebih komponen zat cair berdasarkan titik didih, pada metode destilasi air ini bahan yang akan didestilasi kontak langsung dengan air mendidih, bahan tersebut mengapung diatas air atau terendam secara sempurna (Sastrohamidjojo, 2004).

Hasil destilasi umumnya berupa minyak atsiri kasar yang mengandung air, diperlukan proses untuk penarikan air dari minyak atsiri agar kualitas minyak atsiri meningkat dan warna menjadi lebih jernih. Hasil penelitian Arswendiyumna (2011), metode penarikan air menggunakan Natrium Sulfat (Na2SO4) anhidrat, dimana air akan ditarik oleh Na2SO4 anhidrat hingga dihasilkan minyak atsiri dengan kemurnian yang tinggi. Minyak atsiri yang sudah diisolasi perlu dilakukan pemeriksaan minyak atsiri untuk mengidentifikasi secara kualitatif dengan cara identifikasi minyak atsiri secara umum dan dianalisa parameter mutu minyak atsiri.

Minyak atsiri dapat diproduksi melalui tiga model metode penyulingan,

yaitu penyulingan dengan air, penyulingan dengan uap, dan penyulingan dengan

air dan uap (Lutony, 2002).

a.       Penyulingan Dengan Air

Pada metode ini, bahan tanaman yang akan disuling mengalami kontak langsung dengan air mendidih. Bahan tersebut mengapung di atas air atau terendam secara sempurna, tergantung dari berat jenis dan jumlah bahan yang disuling. Ciri khas dari metode ini ialah kontak langsung antara bahan dengan air mendidih. Oleh karena itu, sering disebut penyulingan langsung. Minyak atsiri dari beberapa jenis bahan seperti bubuk buah badam dan bunga mawar cocok diproduksi dengan cara ini, sebab seluruh bagian bahan harus tercelup dan bergerak bebas dalam air mendidih. Jika disuling dengan metode uap langsung, bahan ini akan merekat dan membentuk gumpalan besar yang kompak, sehingga uap tidak dapat berpenetrasi ke dalam bahan (Lutony, 2002).

b.      Penyulingan Dengan Air Dan Uap Pada model penyulingan ini, bahan tanaman yang akan di suling diletakkan di atas rak-rak atau saringan berlubang. Kemudian ketel penyulingan diisi dengan air sampai permukaannya tidak jauh dari bawah saringan. Ciri khas dari model ini yaitu uap selalu dalam keadaan basah, jenuh dan tidak terlalu panas. Bahan yang disuling hanya berhubungan dengan uap dan tidak dengan air panas (Lutony, 2002).

c.       Penyulingan Dengan Uap

Model ini disebut juga penyulingan uap atau penyulingan tak langsung. Pada prinsipnya, model ini sama dengan penyulingan langsung. Hanya saja, air penghasil uap tidak diisikan bersama - sama dalam ketel penyulingan. Uap yang digunakan berupa uap jenuh atau uap kelewat panas pada tekanan lebih dari 1 atmosfer. Di dalam proses penyulingan dengan uap ini, uap dialirkan melalui pipa uap melingkar yang berpori yang terletak dibawah bahan tanaman yang akan di suling. Kemudian uap akan bergerak menuju ke bagian atas melalui bahan yang disimpan di atas saringan (Lutony, 2002).

3.      Minyak Atsiri

Minyak atsiri adalah zat berbau yang terkandung dalam tanaman. Minyak ini disebut juga minyak menguap, minyak eteris, minyak esensial karena pada suhu biasa (suhu kamar) mudah menguap di udara terbuka. Istilah esential dipakai karena minyak atsiri mewakili bau dari tanaman asalnya. Dalam keadaan segar dan murni tanpa pencemaran, minyak atsiri umumnya tidak berwarna. Namun, pada penyimpanan lama minyak atsiri dapat teroksidasi dan membentuk resin serta warnanya berubah menjadi lebih tua (Gunawan, 2010).

Minyak atsiri, minyak mudah menguap atau minyak terbang merupakan campuran dari senyawa yang berwujud cairan atau padatan yang memiliki komposisi maupun titik didih yang beragam. Penyulingan dapat di defenisikan sebagai proses pemisahan komponen-komponen suatu campuran yang terdiri dari atas dua cairan atau lebih berdasarkan perbedaan tekanan uap mereka atau berdasarkan perbedaan titik didih komponen-komponen senyawa tersebut (Sastrohamidjojo, 2004).

Minyak atsiri dihasilkan dari bagian jaringan tanaman tertentu seperti akar, batang, kulit, daun, bunga, buah, atau biji. Sifat minyak atsiri yang menonjol antara lain mudah menguap pada suhu kamar, mempunyai rasa getir, berbau wangi sesuai dengan aroma tanaman yang menghasilkannya, dan umumnya larut dalam pelarut organik (Lutony, 2002).

4.      Terpenoid

Terpenoid merupakan komponen-komponen tumbuhan yang mempunyai bau  dan dapat diisolasi dari bahan nabati dengan penyulingan yang disebut minyak atsiri. Minyak atsiri yang berasal dari bunga pada awalnya dikenal dari penentuan struktur secara sederhana, yaitu dengan perbandingan atom hidrogen dan atom karbon dari senyawa terpenoid yaitu 8:5 dan dengan perbandingan tersebut dapat dikatakan  bahwa senyawa tersebut adalah golongan terpenoid.

Terpen adalah suatu    senyawa yang  tersusun   atas   isoprene  CH2=C(CH3)-

CH=CH2 dan kerangka karbonnya dibangun oleh penyambungan dua atau lebih  satuan C5 ini. Terpenoid terdiri atas beberapa macam senyawa seperti monoterpen  dan seskuiterpen yang mudah menguap, diterpen yang sukar menguap, dan triterpen  dan sterol yang tidak menguap. Secara umum senyawa ini larut dalam lemak  dan  terdapat   dalam   sitoplasma  sel   tumbuhan.   Biasanya  senyawa     ini    diekstraksi dengan menggunakan petroleum  eter, eter,  atau kloroform. Steroid merupakan

senyawa triterpen yang terdapat dalam bentuk glikosida (Harborne, 1987).

Uji triterpenoid dilakukan dengan cara melarutan uji sebanyak 2 mL  diuapkan. Residu yang diperoleh dilarutkan dalam 0,5 mL kloroform, lalu ditambah  dengan 0,5 mL asam asetat anhidrat. Selanjutnya, campuran ini ditetesi dengan 2  mL asam sulfat pekat melalui dinding tabung tersebut. Bila terbentuk warna hijau  kebiruan menunjukkan adanya sterol. Jika hasil yang diperoleh berupa  cincin  kecokelatan atau violet pada perbatasan dua pelarut, menunjukkan adanya  triterpenoid (Jones and Kinghorn, 2006; Evans, 2009).

5.      Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Kromatografi adalah suatu nama yang diberikan untuk teknik pemisahan tertentu. Pada dasarnya semua cara kromatografi menggunakan dua fase yaitu fasa tetap (stationary) dan fasa gerak (mobile), pemisahan tergantung pada gerakan relatif dari dua fasa tersebut.

Cara-cara kromatografi dapat digolongkan sesuai dengan sifat-sifat dari fasa tetap, yang dapat berupa zat padat atau zat cair. Jika fasa tetap berupa zat padat maka cara tersebut dikenal sebagai kromatografi serapan, jika zat cair dikenal sebagai kromatografi partisi. Karena fasa bergerak dapat berupa zat cair atau gas maka semua ada empat macam sistem kromatografi yaitu kromatografi serapan yang terdiri dari kromatografi lapis tipis dan kromatografi penukar ion, kromatografi padat, kromatografi partisi dan kromatografi gas-cair serta kromatografi kolom kapiler (Hostettmann, K., dkk., 1995).

   IV.            Alat dan Bahan

ALAT

1.      Seperangkat alat destilasi

2.      Seperangkat alat KLT

BAHAN

1.      Daun Sereh (Cymbopogon winterianus)

2.      Minyak citronella

3.      Aquadest

4.      n-Heksan

5.      Natrium Sulfat

6.      Etil Asetat

      V.            Cara Kerja

1.      ISOLASI

Timbang 1000 gram daun sereh segar yang dirajang dengan ukuran ± 1 cm, masukkan ke dalam labu destilasi stahl kemudian tambahkan air sebanyak 300 ml dan batu didih. Hubungkan labu dengan pendigin dan alat penampung berskala. Didihkan labu dengan pemanasan yang sesuai selama 3 jam atau sampai minyak atsiri terdestilasi secara sempurna dan tidak bertambah lagi dalam bagian penampung berskala. Minyak yang diperoleh diukur untuk mengetahui rendemen, kemudian pisahkan minyak atsiri dari air dengan bantuan natrium sulfat.

2.      IDENTIFIKASI

Kromatografi lapis tipis:

a.       Fase diam : Silika gel GF 254

b.      Fase gerak : n-heksan : etil asetat (13:1, 7:3, 4:6)

c.       Cuplikan : Minyak atsiri hasil destilasi dan minyak citronella

d.      Deteksi : UV 254

   VI.            Hasil

1.      Isolasi

Nama simplisia                : Daun Sereh (Cymbopogon winteranius)

Metode ekstraksi            : Destilasi Air

Jumlah pelarut                 : Aquadest 400 ml

Jumlah siklus / waktu      : 1 jam 20 menit

Rendemen                       : -

Pemerian Ekstrak

Aroma                 : khas aromatik

Warna                 : keruh / kekuningan

Bentuk / tekstur  : minyak menguap

VII.            Pembahasan

Minyak atsiri merupakan minyak yang umumnya dihasilkan dari tumbuh-tumbuhan. Minyak atsiri memiliki ciri-ciri yaitu mudah menguap pada suhu kamar dan memiliki aroma yang wangi sesuai dengan tumbuhan penghasilnya. Sebagian besar minyak atsiri berfungsi sebagai antibakteri dan antijamur.

Pada praktikum kali ini dilakukan isolasi minyak atsiri dari daun sereh (Cymbopogon winteranius) menggunakan cara destilasi air dan identifikasi minyak atsiri hasil isolasi menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT). Cara destilasi merupakan cara yang populer untuk memproduksi minyak atsiri. Destilasi yang digunakan adalah destilasi dengan pelarut air dengan dasar pemisahan minyak atsiri immiscibility (tidak campur) dan densitas antara minyak dan air.

Sereh yang diisolasi sebanyak 100 gram, dicuci dan dirajang kecil-kecil untuk memperluas permukaan sereh yang akan diisolasi. Dimasukkan dalam alat destilator dan ditambah pelarut yaitu air 400 ml. Destilator dinyalakan dan ditunggu sampai wadah penampung hasil isolasi yang ditutup dengan kertas alumunium foil terisi penuh. Destilasi dilakukan pada suhu 100˚C (suhu air mendidih) dan selama 1 jam 20 menit (wadah penuh).

Hasil destilasi dimasukkan dalam corong pisah untuk memisahkan minyak dan air dan ditambahkan natrium sulfat anhidrat untuk mempercepat pemisahan. Hasil isolasi tidak dapat dihitung rendemennya karena minyak atsiri yang diperoleh terlalu sedikit.

Pengujian minyak atsiri menggunakan metode kromatografi lapis tipis (KLT) menggunakan fase diam silika gel GF 36, fase gerak n-heksan : etil asetat (4 : 6) sebanyak 10 ml dengan pembanding minyak citronell. Minyak atsiri dan pembanding ditotolkan sebanyak 10 totolan pada silika gel kemudian dimasukkan dalam chumber yang telah dijenuhkan. Tunggu sampai fase gerak naik pada batas fase diam. Setelah mencapai batas, ambil dengan pinset, angin-anginnya sebentar, lalu ujuidibawah sinau UV 366. Dari hasil identifikasi menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT) didapatkan hasil bahwa minyak atsiri tidak terdeteksi / tidak nampak totolan. Hal ini bisa dikarenakan karena minyak atsiri hasil isolasi yang terlalu sedikit / bercampur air dan minyak atsiri yang diuji sudah menguap. Oeh karena itu, harga Rf tidak bisa dihitung karena minyak atsiri tidak terdeteksi.

VIII.            Kesimpulan

Berdasarkan hasil praktikum dapat disimpulkan bahwa hasil isolasi minyak atsiri dari daun sereh sangat sedikit sehingga tidak dapat dihitung rendemennya dan hasil identifikasi menggunakan kromatografi lapis tipis dibawah sinar UV 366 menunjukkan minyak atsiri dan pembandingnya tidak terlihat / tidak terdeteksi sehingga tidak bisa dihitung harga Rf dikarenakan minyak atsiri yang terlalu sedikit / masih bercampur dengan air dan minyak atsiri sudah menguap. 

   IX.            Daftar Pustaka

Armando, Rochim, 2009, Memproduksi 15 Minyak Atsiri Berkualitas, Penebar Swadaya, Jakarta

Gunawan, D dan Mulyani, S., 2010, Ilmu Obat Alam (Farmakognosi) Jilid 1, Penebar Swadaya, Jakarta.

Harbone, J.B., 1987, Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan, Terbitan Kedua. Bandung: ITB

Harris, R., 1990. Tanaman Minyak Atsiri. Penebar Swadaya, Jakarta.

Hostettmann, K., dkk., 1995, Cara Kromatografi Preparatif, Penerbit ITB, Bandung.

Jones, W. P. and A. D.  Kinghorn.  2006. Extraction  of  Plant Secondary

Lutony, T.L, dan Yeyet Rahmayati. (2002). Produksi dan Perdagangan Minyak Atsiri. Jakarta: Penerbit Penebar Swadaya. Hal 1, 22, 65, 105, 109, 112-113, 32 -33.

Metabolites. In: Sarker, S. D., Latif, Z. and Gray, A. I., eds. Natural  Products Isolation. 2^nd Ed. New Jersey: Humana Press. P.341-342

Sastrohamidjojo, H. (2004), Kimia Minyak Atsiri. Penerbit Gadjah Mada University Press, Yogyakarta. Hal.1, 3, 66 – 67.